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顯微鏡使用時用到的內反射熒光顯微術是什麼原理?


內反射熒光顯微術(Total intern金相顯微鏡al reflection fluorescence microscopy,TIRFM)

利用全內反射產生的消逝波激發樣品,使樣品表面數百納米厚的薄層內的熒光團受到激發,再用高靈敏度和高時間顯微鏡分辨率的攝像機CCD來捕捉熒光並用計算機進行顯像,從而實現對生物樣品觀測的一種新生技術。由於消逝波特點及CCD的優勢使全內反射熒光顯微鏡具有高信噪比和高時間分辨率,因此它在對單分子的動態觀測具有很高的應用價值。
1。棱鏡型全內反射熒光顯微鏡

棱鏡型全內反射熒光顯微鏡就是利用激光經過棱鏡並產生放大鏡全內反望遠鏡射,其消逝波照射已被熒光標記的生物樣品,其激發光從另一側進入目鏡,並被CCD相機捕捉,
2。物鏡型全內反射顯微鏡

天文望遠鏡在物鏡型全內反射顯微術中,顯微鏡的物鏡即作為收集樣品熒光信號的接收器,同時又作為發生全內反射的光學器件。

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